一种红花油体的提取方法[发明专利]

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 CN 107384582 A(43)申请公布日 2017.11.24

(21)申请号 201710793460.8(22)申请日 2017.09.06

(71)申请人 吉林农业大学

地址 130000 吉林省长春市新城大街2888

号(72)发明人 王秀然　李校堃　李海燕　王法微　

杨晶　官丽莉　刘秀明　卢天成　刘欣　(74)专利代理机构 长春菁华专利商标代理事务

所(普通合伙) 22210

代理人 陶尊新(51)Int.Cl.

C11B 1/06(2006.01)C11B 1/04(2006.01)C11B 3/00(2006.01)

权利要求书1页 说明书4页 附图1页

(54)发明名称

一种红花油体的提取方法

(57)摘要

本发明提供一种红花油体的提取方法，属于红花油体提取方法领域。该方法包括：先将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；将浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；将处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；提取得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。本发明的提取方法快速简单、提取量大、提取效率高、用料简单、适合工业生产。

CN 107384582 ACN 107384582 A

权　利　要　求　书

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1.一种红花油体的提取方法，其特征在于，该方法包括：步骤一：将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；步骤二：将步骤一浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；步骤三：将步骤二得到的处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；步骤四：提取步骤三得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。

2.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述步骤一的浸泡时间为10-20min。

3.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述步骤二的处理时间为2-3min。

4.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述步骤二的种子重量(g)：PBS缓冲溶液的体积(L)为100：1。

5.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述的NaCl溶液的浓度为15-30mM。

6.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述的步骤四的搅拌速度为28000rpm，搅拌时间为20-30s。

7.根据权利要求1所述的一种红花油体的提取方法，其特征在于，所述的步骤四的离心时间为10-15min，转速为4000-6000×g。

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一种红花油体的提取方法

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技术领域

[0001]本发明属于红花油体提取方法领域，具体涉及一种红花油体的提取方法。背景技术

[0002]红花(Carthamustinctorius L.)又名草红花、黄兰花、菊红花,为菊科(Compositae)红花属(Car-thamus L.)1-2年生草本植物。红花是红花属中唯一的栽培种,它原产大西洋东部、非洲西北的加那利群岛及地中海沿岸。根据著名植物学家虎克(Hooker)与杰克逊(Jackson)的论著,红花属全世界共60种,后经分类学家进一步研究和归类,现在一般认为约有20-25种。种子油脂是以油体的形式贮藏于胚乳、子叶或盾片等组织中。油体是由单层的磷脂膜,内包含TAG,表面镶嵌油体蛋白、钙结合蛋白、固醇结合蛋白。储存在油体中的TAG为种子萌发提供能量。

[0003]现有的提取红花油体的方法为采用两相或三相倾析式离心机，采用重力除杂倾倒获得液体相和部分油体相，然后采用离心机的方法将油体相和液体相分离，由于现有的提取方法为倾析式离心除杂,多次离心，不适合大规模连续分离，离心除杂过程中造成部分油体损失，制备过程中大量使用化学试剂造成环境压力。发明内容

[0004]本发明的目的是提供一种红花油体的提取方法，该方法提取量大、提取效率高。[0005]本发明提供一种红花油体的提取方法，该方法包括：[0006]步骤一：将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；[0007]步骤二：将步骤一浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；[0008]步骤三：将步骤二得到的处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；[0009]步骤四：提取步骤三得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体。[0010]优选的是，所述步骤一的浸泡时间为10-20min。[0011]优选的是，所述步骤二的处理时间为2-3min。[0012]优选的是，所述步骤二的种子重量(g)：PBS缓冲溶液的体积(L)为100：1。[0013]优选的是，所述的NaCl溶液的浓度为15-30mM。[0014]优选的是，所述的步骤四的搅拌速度为28000rpm，搅拌时间为20-30s。[0015]优选的是，所述的步骤四的离心时间为10-15min，转速为4000-6000×g。[0016]本发明的有益效果

[0017]本发明提供一种红花油体的提取方法，该方法包括：先将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；将浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；将处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；提取得到的上层油体液，然后加入PBS乳化机中搅拌混匀，放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离

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心，得到红花油体。与现有技术相对比，本发明的提取方法一步离心并利用浮力作用制得油体快速简单、连续流离心机可以连续工作制备提取量大、提取效率高、用料简单、适合工业生产。

附图说明

[0018]图1为本发明实施例1制备得到的红花油体的显微镜照片；[0019]图2为对比例1制备得到的红花油体的显微镜照片。

具体实施方式

[0020]本发明提供一种红花油体的提取方法，该方法包括：[0021]步骤一：将红花种子进行水洗，然后在PBS缓冲液中浸泡；所述的水洗优选是将红花种子采用分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗，所述的分选机优选为型号为TFKH1200型葵花籽脱壳分选机，所述的水洗次数不限，直至将污染物洗掉为准，优选为3-5遍，所述的红花种子的质量(g)：水的体积(L)为100：1；水洗后进行晾干，然后将其浸泡在PBS缓冲液中，浸泡时间优选为10-20min，所述的PBS缓冲液的浓度优选为10mM，pH为7.2；[0022]步骤二：将步骤一浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理；所述处理时间优选为2-3min；种子重量(g)：PBS缓冲溶液的体积(L)为100：1；胶体磨的型号优选为GB/T 14466-93；

[0023]步骤三：将步骤二得到的处理后的溶液进行离心，然后加入NaCl溶液，在室温下静置2-8h，得到分层后的油体液；所述的离心优选采用型号为GQ75管式分离机进行离心除杂，离心功率优选为0.5-0.7KW，更优选为0.6KW，频率优选为15-25Hz，更优选为20Hz，离心除杂后的油体损失在2％左右，离心除杂后加入NaCl溶液的目的是一方面钠离子在油体表面富集，在一定离子浓度条件下有助于稳定油体表面电荷，使得油体处在一定的电场作用下，有利于油体离散；另一方面，在一定盐浓度条件下有助于油体悬浮，所述的NaCl溶液的浓度优选为15-30mM，更优选为20mM；将油体液在室温下静置2-8小时，油体液分层；[0024]步骤四：提取步骤三得到的上层油体液，除去下层废液，然后将上层油体液加入PBS乳化机中搅拌混匀，所述的PBS乳化机的型号优选为FA25，搅拌速度优选为28000rpm，搅拌时间优选为20-30s，将搅拌后的油体液放置在室温中静置2-4h，取上层油体，然后离心，得到红花油体；所述的离心时间优选为10-15min，，转速为4000-6000×g，离心机的型号为J-26XP。

[0025]本发明通过控制油体液在室温中的静置时间，对油体液进行分层，所述的静置时间为2-4h，当静置时间少于2h时，油体分层不明显；当静置时间大于4h时，得到的油体液容易变质。

[0026]下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的说明，实施例中涉及到的原料均为商购获得。

[0027]对比例1[0028]步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子15分钟，没过种子即可；

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步骤二：将1000g种子和10L PBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中

研磨进行胶体磨处理2min；[0030]步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.6KW，频率为20Hz，然后在室温下静置4h，得到分层后的油体液；油体收率为：20％。[0031]步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置3h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心5000×g，12min，得到红花油体。[0032]实验结果表明：对比例1制备得到的红花油体的提取率为11％，图2为对比例1制备得到的红花油体的显微镜照片，从图2可以看出，油体出现了大量的聚集现象。[0033]实施例1[0034]步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子15分钟，没过种子即可；[0035]步骤二：将1000g种子和10LPBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；[0036]步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.6KW，频率为20Hz，加入浓度为20mM的NaCl溶液，然后在室温下静置4h，得到分层后的油体液；油体收率为：60％。[0037]步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置3h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心5000g，12min，得到红花油体。[0038]实验结果表明：实施例1制备得到的红花油体的提取率为15％，图1为本发明实施例1制备得到的红花油体的显微镜照片，从图1可以看出，本发明的油体粒径均匀，没有出现聚集。

[0039]实施例2[0040]步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来的种子用水洗3遍，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子20分钟，没过种子即可；[0041]步骤二：：将1000g种子和10L PBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；[0042]步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.5KW，频率为15Hz，加入浓度为20mM的NaCl溶液，然后在室温下静置2h，得到分层后的油体液；油体收率为50％；[0043]步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置2h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心4000×g，10min，得到红花油体。[0044]实验结果表明：实施例2制备得到的红花油体的提取率为14％，油体粒径均一，无聚集。

[0045]实施例3

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步骤一：将红花种子用TFKH1200型葵花籽脱壳分选机进行分选，然后将分选出来

的种子用水洗3遍，直至将灰尘洗掉，红花种子的质量(1000g)：水的体积(10L)为1：10，晾干，使用前用10mM(pH7.2)的PBS缓冲液浸泡种子20分钟，没过种子即可；[0047]步骤二：：将1000g种子和10L PBS缓冲溶液放入型号为GB/T 14466-93磨胶体磨中研磨进行胶体磨处理2min；[0048]步骤三：将得到的处理后的溶液放入GQ75管式分离机中进行离心除杂，离心功率为0.7KW，频率为25Hz，加入浓度为20mM的NaCl溶液，然后在室温下静置6h，得到分层后的油体液；油体收率为45％；[0049]步骤四：去下层废液，取上层油体，然后将上层油体加入PBS乳化机(型号为FA25)搅拌混匀30s，转速为28000rpm，将搅拌后的油体液放置在室温中静置4h，去下层废液，取上层油体，然后用型号为J-26XP离心机进行离心6000×g，15min，得到红花油体。[0050]实验结果表明：实施例3制备得到的红花油体的提取率为14％，油体粒径均一，无聚集。

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说　明　书　附　图

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图1

图2

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